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ニューカッスル病ウイルスRNA検出キット（PCR-蛍光プロービング）
【商品名】ニューカッスル病ウイルスのリアルタイム PCR 検出キット
【パッケージ】50キット/箱
【表示】ニューカッスル病ウイルス用リアルタイム PCR 検出キットは、鳥類の喉のスワブ、排泄腔スワブ、組織、ニワトリ胚の尿膜液、および細胞培養物中のニューカッスル病ウイルス RNA の検出に適用できます。テスト結果は研究目的のみであり、臨床診断用ではありません。
【主な成分と内容】
名前 | 仕様 | 量 |
NDV反応液 | 1150μl/チューブ | 1 |
NDVポジティブコントロール | 100μl/チューブ | 1 |
ネガティブコントロール | 100μl/チューブ | 1 |
【保管および賞味期限】
-20±5℃で保存、凍結融解を3回以下繰り返した場合、賞味期限は12ヶ月です。
【試験方法】
1. 核酸抽出
核酸抽出は市販の RNA 抽出キットを使用できますので、キットの説明書に従ってください。
2. PCR増幅
2.1 試験サンプルの数を計算し、n+2 個の PCR 反応チューブを取り、各チューブに 23 μl の反応溶液を追加します。
2.2 ネガティブコントロール、ポジティブコントロール、サンプルの核酸をそれぞれ 2μl を上記の PRC 反応チューブに加え、8000rpm で数秒間遠心し、蛍光定量 PCR アンプに入れる。
2.3 プローブ検出モードは、Reporter Dye1: FAM、Quencher Dye: NONE に設定されています。
2.4 反応条件は次のように設定されます。
55℃ 15分 1サイクル 95℃ 30 秒、1 サイクル。 95℃ 10s → 60℃ 30s (蛍光を採取) 40サイクルファイルを保存して実行します。
【結果の解釈】
1. 1 回の実験で次の要件を同時に満たす必要があります。一致しない場合、実験は無効であり、繰り返す必要があります。
ネガティブコントロールには増幅曲線がありませんでした
陽性対照のFAMチャネルの増幅曲線には有意な対数増殖期があり、FAMチャネルの増幅曲線のCt値は≤32でした。
2. 検体の FAM チャンネルに増幅曲線がない場合、検体は NDV 陰性と判定できます。FAM チャネルが対数増殖期の増幅曲線を持ち、Ct 値が 36 以下の場合、NDV 陽性と判断できます。36 < Ct 値 < 40 は疑わしいサンプルであり、確認のために再テストする必要があります。
【予防】
1. 実験室の管理は、PCR 遺伝子増幅実験室の管理仕様書に厳密に従うものとする。ラボの担当者は、専門的な訓練を受けている必要があります。実験プロセスは、異なるエリア (試薬調製エリア、検体調製エリア、増幅および生成物分析エリア) で厳密に実施する必要があります。すべての消耗品は、滅菌後に使い捨てるものとします。実験操作の各段階での特別な装置、機器、および備品は、相互に使用してはなりません。
2. 試薬および検体調製段階のための生物学的安全キャビネットを準備してください。実験中は白衣、使い捨て手袋、ピペッターを着用する。
3. 試薬の凍結融解の繰り返しは極力避けてください。使用前に、試薬を完全に解凍し、8000rpm で数秒間遠心分離する必要があります。
4. 検体調製エリアで使用したピペットは、消毒剤の入った容器に入れ、滅菌後廃棄物と一緒に捨ててください。
5. 実験後、作業台とピペッターを 10% 次亜塩素酸塩または 75% アルコールまたは紫外線ランプで処理しました。
【製造】
名前： 山東Xindaの遺伝子技術Co.、株式会社
Shandong Sinder Technology Co., Ltdの子会社
住所: 山東省諸城市Shungeng Road、Bandaohuigu工業団地B2棟
郵便番号: 262233
電話: +86 - 0532 5882 0810
ニューカッスル病ウイルスRNA検出キット（PCR-蛍光プロービング）
【商品名】ニューカッスル病ウイルスのリアルタイム PCR 検出キット
【パッケージ】50キット/箱
【表示】ニューカッスル病ウイルス用リアルタイム PCR 検出キットは、鳥類の喉のスワブ、排泄腔スワブ、組織、ニワトリ胚の尿膜液、および細胞培養物中のニューカッスル病ウイルス RNA の検出に適用できます。テスト結果は研究目的のみであり、臨床診断用ではありません。
【主な成分と内容】
名前 | 仕様 | 量 |
NDV反応液 | 1150μl/チューブ | 1 |
NDVポジティブコントロール | 100μl/チューブ | 1 |
ネガティブコントロール | 100μl/チューブ | 1 |
【保管および賞味期限】
-20±5℃で保存、凍結融解を3回以下繰り返した場合、賞味期限は12ヶ月です。
【試験方法】
1. 核酸抽出
核酸抽出は市販の RNA 抽出キットを使用できますので、キットの説明書に従ってください。
2. PCR増幅
2.1 試験サンプルの数を計算し、n+2 個の PCR 反応チューブを取り、各チューブに 23 μl の反応溶液を追加します。
2.2 ネガティブコントロール、ポジティブコントロール、サンプルの核酸をそれぞれ 2μl を上記の PRC 反応チューブに加え、8000rpm で数秒間遠心し、蛍光定量 PCR アンプに入れる。
2.3 プローブ検出モードは、Reporter Dye1: FAM、Quencher Dye: NONE に設定されています。
2.4 反応条件は次のように設定されます。
55℃ 15分 1サイクル 95℃ 30 秒、1 サイクル。 95℃ 10s → 60℃ 30s (蛍光を採取) 40サイクルファイルを保存して実行します。
【結果の解釈】
1. 1 回の実験で次の要件を同時に満たす必要があります。一致しない場合、実験は無効であり、繰り返す必要があります。
ネガティブコントロールには増幅曲線がありませんでした
陽性対照のFAMチャネルの増幅曲線には有意な対数増殖期があり、FAMチャネルの増幅曲線のCt値は≤32でした。
2. 検体の FAM チャンネルに増幅曲線がない場合、検体は NDV 陰性と判定できます。FAM チャネルが対数増殖期の増幅曲線を持ち、Ct 値が 36 以下の場合、NDV 陽性と判断できます。36 < Ct 値 < 40 は疑わしいサンプルであり、確認のために再テストする必要があります。
【予防】
1. 実験室の管理は、PCR 遺伝子増幅実験室の管理仕様書に厳密に従うものとする。ラボの担当者は、専門的な訓練を受けている必要があります。実験プロセスは、異なるエリア (試薬調製エリア、検体調製エリア、増幅および生成物分析エリア) で厳密に実施する必要があります。すべての消耗品は、滅菌後に使い捨てるものとします。実験操作の各段階での特別な装置、機器、および備品は、相互に使用してはなりません。
2. 試薬および検体調製段階のための生物学的安全キャビネットを準備してください。実験中は白衣、使い捨て手袋、ピペッターを着用する。
3. 試薬の凍結融解の繰り返しは極力避けてください。使用前に、試薬を完全に解凍し、8000rpm で数秒間遠心分離する必要があります。
4. 検体調製エリアで使用したピペットは、消毒剤の入った容器に入れ、滅菌後廃棄物と一緒に捨ててください。
5. 実験後、作業台とピペッターを 10% 次亜塩素酸塩または 75% アルコールまたは紫外線ランプで処理しました。
【製造】
名前： 山東Xindaの遺伝子技術Co.、株式会社
Shandong Sinder Technology Co., Ltdの子会社
住所: 山東省諸城市Shungeng Road、Bandaohuigu工業団地B2棟
郵便番号: 262233
電話: +86 - 0532 5882 0810
