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鳥インフルエンザウイルスH9サブタイプRNA検出キット(PCR-蛍光プローブ)
（商品名）鳥インフルエンザウイルスH9サブタイプRNA検出キット(PCR-蛍光プローブ)
（パッケージ）50キット/箱
（表示）鳥インフルエンザウイルス H9 サブタイプ RNA 検出キット (PCR 蛍光プロービング) は、鳥喉ぬぐい液、総排泄腔ぬぐい液、組織、鶏胚尿膜腔液および細胞培養液中の鳥インフルエンザウイルス H9 サブタイプ RNA の検出に適用できます。検査結果は研究のみを目的としており、臨床診断を目的としたものではありません。
（主なコンポーネントと内容）
名前 | 仕様 | 量 |
H9-AVI 反応溶液 | 1150μl/チューブ | 1 |
H9-AVI ポジティブコントロール | 100μl/チューブ | 1 |
ネガティブコントロール | 100μl/チューブ | 1 |
（保管と有効期限）
-20±5℃で保管、冷凍・解凍を3回以内繰り返した場合、賞味期限は12ヶ月です。
（試験方法）
1. 核酸抽出
核酸抽出は市販のRNA抽出キットをご利用いただけますので、キットの説明書に従ってください。
2. PCR増幅
2.1 試験サンプルの数を計算し、n+2 PCR 反応チューブを取り、各チューブに 23μl の反応溶液を加えます。
2.2 ネガティブコントロール、ポジティブコントロール、サンプルの核酸 2μl を上記の PRC 反応チューブにそれぞれ加え、8000rpm で数秒間遠心分離し、蛍光定量 PCR アンプに入れます。
2.3 プローブ検出モードは、Reporter Dye1: FAM、Quencher Dye: NONE に設定されます。
2.4 反応条件は次のように設定します。
55℃、15分間を1サイクル。 95℃、30秒、1サイクル。 95℃ 10秒→60℃ 30秒（蛍光収集）を40サイクル。ファイルを保存して実行します。
（結果の解釈）
1. 1 つの実験で次の要件が同時に満たされる必要があります。満たさない場合、実験は無効となり、繰り返す必要があります。
ネガティブコントロールには増幅曲線がありませんでした
陽性対照 FAM チャネルの増幅曲線には顕著な対数増殖期があり、FAM チャネル増幅曲線の Ct 値は ≤ 32 でした。
2. 検査サンプルの FAM チャネルに増幅曲線がない場合、または Ct 値 > 40 の場合、サンプルは鳥インフルエンザ H9 サブタイプ陰性であると判定できます。FAM チャネルの対数増殖期増幅曲線と Ct 値 ≤ 40 があれば、鳥インフルエンザ H9 サブタイプ陽性と判断できます。
（予防）
1. 検査室の管理は、PCR 遺伝子増幅検査室の管理仕様書に厳密に従って行わなければなりません。研究所の職員は専門的な訓練を受けていなければなりません。実験プロセスは厳密に異なるエリア (試薬調製エリア、検体調製エリア、増幅および生成物分析エリア) で実施されます。すべての消耗品は滅菌後に使い捨てとします。実験操作の各段階での特別な装置、機器、および消耗品は、相互に使用してはならない。
2. 試薬および検体調製段階のために生物学的安全キャビネットを準備してください。実験中は、白衣、使い捨て手袋、ピペッターを使用します。
3. 試薬の凍結融解を繰り返すことはできる限り避けてください。使用前に試薬を完全に解凍し、8000rpm で数秒間遠心分離します。
4. 検体調製エリアで使用したピペットは消毒剤の入った容器に入れ、滅菌後廃棄物と一緒に捨ててください。
5. 実験後、作業台とピペッターを 10% 次亜塩素酸塩または 75% アルコールまたは紫外線ランプで処理しました。
（製造）
名前： 山東新達遺伝子技術有限公司
Shandong Sinder Technology Co., Ltd の子会社
住所: 山東省諸城市順興路八島会谷工業団地B2棟
郵便番号: 262233
電話: +86 - 0532 5882 0810
鳥インフルエンザウイルスH9サブタイプRNA検出キット(PCR-蛍光プローブ)
（商品名）鳥インフルエンザウイルスH9サブタイプRNA検出キット(PCR-蛍光プローブ)
（パッケージ）50キット/箱
（表示）鳥インフルエンザウイルス H9 サブタイプ RNA 検出キット (PCR 蛍光プロービング) は、鳥喉ぬぐい液、総排泄腔ぬぐい液、組織、鶏胚尿膜腔液および細胞培養液中の鳥インフルエンザウイルス H9 サブタイプ RNA の検出に適用できます。検査結果は研究のみを目的としており、臨床診断を目的としたものではありません。
（主なコンポーネントと内容）
名前 | 仕様 | 量 |
H9-AVI 反応溶液 | 1150μl/チューブ | 1 |
H9-AVI ポジティブコントロール | 100μl/チューブ | 1 |
ネガティブコントロール | 100μl/チューブ | 1 |
（保管と有効期限）
-20±5℃で保管、冷凍・解凍を3回以内繰り返した場合、賞味期限は12ヶ月です。
（試験方法）
1. 核酸抽出
核酸抽出は市販のRNA抽出キットをご利用いただけますので、キットの説明書に従ってください。
2. PCR増幅
2.1 試験サンプルの数を計算し、n+2 PCR 反応チューブを取り、各チューブに 23μl の反応溶液を加えます。
2.2 ネガティブコントロール、ポジティブコントロール、サンプルの核酸 2μl を上記の PRC 反応チューブにそれぞれ加え、8000rpm で数秒間遠心分離し、蛍光定量 PCR アンプに入れます。
2.3 プローブ検出モードは、Reporter Dye1: FAM、Quencher Dye: NONE に設定されます。
2.4 反応条件は次のように設定します。
55℃、15分間を1サイクル。 95℃、30秒、1サイクル。 95℃ 10秒→60℃ 30秒（蛍光収集）を40サイクル。ファイルを保存して実行します。
（結果の解釈）
1. 1 つの実験で次の要件が同時に満たされる必要があります。満たさない場合、実験は無効となり、繰り返す必要があります。
ネガティブコントロールには増幅曲線がありませんでした
陽性対照 FAM チャネルの増幅曲線には顕著な対数増殖期があり、FAM チャネル増幅曲線の Ct 値は ≤ 32 でした。
2. 検査サンプルの FAM チャネルに増幅曲線がない場合、または Ct 値 > 40 の場合、サンプルは鳥インフルエンザ H9 サブタイプ陰性であると判定できます。FAM チャネルの対数増殖期増幅曲線と Ct 値 ≤ 40 があれば、鳥インフルエンザ H9 サブタイプ陽性と判断できます。
（予防）
1. 検査室の管理は、PCR 遺伝子増幅検査室の管理仕様書に厳密に従って行わなければなりません。研究所の職員は専門的な訓練を受けていなければなりません。実験プロセスは厳密に異なるエリア (試薬調製エリア、検体調製エリア、増幅および生成物分析エリア) で実施されます。すべての消耗品は滅菌後に使い捨てとします。実験操作の各段階での特別な装置、機器、および消耗品は、相互に使用してはならない。
2. 試薬および検体調製段階のために生物学的安全キャビネットを準備してください。実験中は、白衣、使い捨て手袋、ピペッターを使用します。
3. 試薬の凍結融解を繰り返すことはできる限り避けてください。使用前に試薬を完全に解凍し、8000rpm で数秒間遠心分離します。
4. 検体調製エリアで使用したピペットは消毒剤の入った容器に入れ、滅菌後廃棄物と一緒に捨ててください。
5. 実験後、作業台とピペッターを 10% 次亜塩素酸塩または 75% アルコールまたは紫外線ランプで処理しました。
（製造）
名前： 山東新達遺伝子技術有限公司
Shandong Sinder Technology Co., Ltd の子会社
住所: 山東省諸城市順興路八島会谷工業団地B2棟
郵便番号: 262233
電話: +86 - 0532 5882 0810
