鳥インフルエンザウイルスH5/H7/ユニバーサルサブタイプRNA検出キット(PCR-蛍光プロービング)
【商品名】鳥インフルエンザウイルスH5/H7/ユニバーサルサブタイプRNA検出キット(PCR-蛍光プロービング)
【パッケージ】50キット/箱
【表示】鳥インフルエンザ ウイルス H5/H7/ユニバーサル RNA 検出キット (PCR-蛍光プロービング) は、鳥の喉のスワブ、排泄腔スワブ、組織、ニワトリ胚の尿膜液および細胞培養物中の鳥インフルエンザ ウイルス H5/H7/ユニバーサル RNA の検出に適用できます。 .テスト結果は研究目的のみであり、臨床診断用ではありません。
【主な成分と内容】
名前 | 仕様 | 量 |
H5/H7/ユニバーサル三価反応液 | 1250μl/チューブ | 1 |
H5/H7/ユニバーサルポジティブコントロール | 250μl/チューブ | 1 |
ネガティブコントロール | 250μl/チューブ | 1 |
【保管および賞味期限】
-20±5℃で保存、凍結融解を3回以下繰り返した場合、賞味期限は12ヶ月です。
【モデル】
ABI 7500、ABI QuantStudio 5、CFX Connect、CFX Opus 96、LightCycler480、Gentiter 96E/96R、LineGene 9600 Plus およびその他の蛍光定量 PCR アンプ。
【試験方法】
1. 核酸抽出
核酸抽出は市販の RNA 抽出キットを使用できますので、キットの説明書に従ってください。
2. PCR増幅
2.1 試験サンプルの数を計算し、n+2 個の PCR 反応チューブを取り、各チューブに 25 μl の反応溶液を追加します。
2.2 ネガティブコントロール、ポジティブコントロール、サンプルの核酸をそれぞれ 5μl を上記の PRC 反応チューブに加え、8000rpm で数秒間遠心し、蛍光定量 PCR アンプに入れる。
2.3 反応条件は次のように設定されます。
アンプの関連パラメータ | |||
システム | 総量:30μl | ||
信号収集 | 鳥インフルエンザ H5/H7/ユニバーサル | H5 サブタイプ - HEX チャネルが蛍光シグナルを収集 | |
H7 サブタイプ - FAM チャネルが蛍光シグナルを収集 | |||
ユニバーサル - ROX チャネルが蛍光シグナルを収集 | |||
PCR反応条件 | ステージ | Condition | サイクル数 |
逆転写 | 55℃:15分 | 1 | |
前変性 | 95℃:30秒 | 1 | |
PCR | 95℃:10秒 | 40 | |
56℃:30秒 (この段階の最後に蛍光シグナルを収集するように設定します) |
【結果の解釈】
1. テスト キットの有効性の判定 :
(1) 弱いポジティブ コントロール: FAM、HEX、および ROX チャネルの Ct 値 ≤ 32、明らかな指数関数的位相の増幅曲線。
(2) ブランク コントロール: FAM、HEX、および ROX チャネルに増幅曲線がないか、増幅曲線が直線またはわずかに斜めであり、有意な指数関数的フェーズがなく、Ct 値が 38 以上であるか、または Ct 値がありません。
2. 結果の決定:
結果判定 | FAMチャンネル | HEXチャンネル | ROXチャンネル |
トリインフルエンザウイルス H5亜型 核酸陽性 | - | + | + |
トリインフルエンザウイルス H7亜型 核酸陽性 | + | - | + |
低病原性鳥インフルエンザウイルス核酸陽性 | - | - | + |
トリインフルエンザウイルス H5/H7 核酸サブタイプ 酸陽性 | + | + | + |
鳥インフルエンザウイルス核酸陰性 | - | - | - |
*ノート:
(1)対数増殖期増幅曲線があり、Ct値≦36の場合、+と判断する。増幅曲線がない場合や Ct 値が 36 以上の場合は - と判定します。36 < Ct 値 < 40 の場合、サンプルは疑わしいため、再テストする必要があります。
(2) いずれかの H5/H7 サブタイプの結果が + で ROX チャネルが - の場合、再テストする必要があります。
【予防】
1. 実験室の管理は、PCR 遺伝子増幅実験室の管理仕様書に厳密に従うものとする。ラボの担当者は、専門的なトレーニングを受けている必要があります。実験プロセスは、異なるエリア(試薬調製エリア、検体調製エリア、増幅および生成物分析エリア)で厳密に実施する必要があります。すべての消耗品は、滅菌後に使い捨てるものとします。実験操作の各段階での特別な装置、機器、および備品は、相互に使用してはなりません。
2. 試薬および検体調製段階のための生物学的安全キャビネットを準備してください。実験中は白衣、使い捨て手袋、ピペッターを着用する。
3. 試薬の凍結融解の繰り返しは極力避けてください。使用前に、試薬を完全に解凍し、8000rpm で数秒間遠心分離する必要があります。
4. 検体調製エリアで使用したピペットは、消毒剤の入った容器に入れ、滅菌後廃棄物と一緒に捨ててください。
5. 実験後、作業台とピペッターを 10% 次亜塩素酸塩または 75% アルコールまたは紫外線ランプで処理しました。
【製造】
名前: 山東Xindaの遺伝子技術Co.、株式会社
Shandong Sinder Technology Co., Ltdの子会社
住所: 山東省諸城市Shungeng Road、Bandaohuigu工業団地B2棟
郵便番号: 262233
電話: +86 - 0532 5882 0810
鳥インフルエンザウイルスH5/H7/ユニバーサルサブタイプRNA検出キット(PCR-蛍光プロービング)
【商品名】鳥インフルエンザウイルスH5/H7/ユニバーサルサブタイプRNA検出キット(PCR-蛍光プロービング)
【パッケージ】50キット/箱
【表示】鳥インフルエンザ ウイルス H5/H7/ユニバーサル RNA 検出キット (PCR-蛍光プロービング) は、鳥の喉のスワブ、排泄腔スワブ、組織、ニワトリ胚の尿膜液および細胞培養物中の鳥インフルエンザ ウイルス H5/H7/ユニバーサル RNA の検出に適用できます。 .テスト結果は研究目的のみであり、臨床診断用ではありません。
【主な成分と内容】
名前 | 仕様 | 量 |
H5/H7/ユニバーサル三価反応液 | 1250μl/チューブ | 1 |
H5/H7/ユニバーサルポジティブコントロール | 250μl/チューブ | 1 |
ネガティブコントロール | 250μl/チューブ | 1 |
【保管および賞味期限】
-20±5℃で保存、凍結融解を3回以下繰り返した場合、賞味期限は12ヶ月です。
【モデル】
ABI 7500、ABI QuantStudio 5、CFX Connect、CFX Opus 96、LightCycler480、Gentiter 96E/96R、LineGene 9600 Plus およびその他の蛍光定量 PCR アンプ。
【試験方法】
1. 核酸抽出
核酸抽出は市販の RNA 抽出キットを使用できますので、キットの説明書に従ってください。
2. PCR増幅
2.1 試験サンプルの数を計算し、n+2 個の PCR 反応チューブを取り、各チューブに 25 μl の反応溶液を追加します。
2.2 ネガティブコントロール、ポジティブコントロール、サンプルの核酸をそれぞれ 5μl を上記の PRC 反応チューブに加え、8000rpm で数秒間遠心し、蛍光定量 PCR アンプに入れる。
2.3 反応条件は次のように設定されます。
アンプの関連パラメータ | |||
システム | 総量:30μl | ||
信号収集 | 鳥インフルエンザ H5/H7/ユニバーサル | H5 サブタイプ - HEX チャネルが蛍光シグナルを収集 | |
H7 サブタイプ - FAM チャネルが蛍光シグナルを収集 | |||
ユニバーサル - ROX チャネルが蛍光シグナルを収集 | |||
PCR反応条件 | ステージ | Condition | サイクル数 |
逆転写 | 55℃:15分 | 1 | |
前変性 | 95℃:30秒 | 1 | |
PCR | 95℃:10秒 | 40 | |
56℃:30秒 (この段階の最後に蛍光シグナルを収集するように設定します) |
【結果の解釈】
1. テスト キットの有効性の判定 :
(1) 弱いポジティブ コントロール: FAM、HEX、および ROX チャネルの Ct 値 ≤ 32、明らかな指数関数的位相の増幅曲線。
(2) ブランク コントロール: FAM、HEX、および ROX チャネルに増幅曲線がないか、増幅曲線が直線またはわずかに斜めであり、有意な指数関数的フェーズがなく、Ct 値が 38 以上であるか、または Ct 値がありません。
2. 結果の決定:
結果判定 | FAMチャンネル | HEXチャンネル | ROXチャンネル |
トリインフルエンザウイルス H5亜型 核酸陽性 | - | + | + |
トリインフルエンザウイルス H7亜型 核酸陽性 | + | - | + |
低病原性鳥インフルエンザウイルス核酸陽性 | - | - | + |
トリインフルエンザウイルス H5/H7 核酸サブタイプ 酸陽性 | + | + | + |
鳥インフルエンザウイルス核酸陰性 | - | - | - |
*ノート:
(1)対数増殖期増幅曲線があり、Ct値≦36の場合、+と判断する。増幅曲線がない場合や Ct 値が 36 以上の場合は - と判定します。36 < Ct 値 < 40 の場合、サンプルは疑わしいため、再テストする必要があります。
(2) いずれかの H5/H7 サブタイプの結果が + で ROX チャネルが - の場合、再テストする必要があります。
【予防】
1. 実験室の管理は、PCR 遺伝子増幅実験室の管理仕様書に厳密に従うものとする。ラボの担当者は、専門的なトレーニングを受けている必要があります。実験プロセスは、異なるエリア(試薬調製エリア、検体調製エリア、増幅および生成物分析エリア)で厳密に実施する必要があります。すべての消耗品は、滅菌後に使い捨てるものとします。実験操作の各段階での特別な装置、機器、および備品は、相互に使用してはなりません。
2. 試薬および検体調製段階のための生物学的安全キャビネットを準備してください。実験中は白衣、使い捨て手袋、ピペッターを着用する。
3. 試薬の凍結融解の繰り返しは極力避けてください。使用前に、試薬を完全に解凍し、8000rpm で数秒間遠心分離する必要があります。
4. 検体調製エリアで使用したピペットは、消毒剤の入った容器に入れ、滅菌後廃棄物と一緒に捨ててください。
5. 実験後、作業台とピペッターを 10% 次亜塩素酸塩または 75% アルコールまたは紫外線ランプで処理しました。
【製造】
名前: 山東Xindaの遺伝子技術Co.、株式会社
Shandong Sinder Technology Co., Ltdの子会社
住所: 山東省諸城市Shungeng Road、Bandaohuigu工業団地B2棟
郵便番号: 262233
電話: +86 - 0532 5882 0810