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腸炎ビブリオ用リアルタイム PCR 検出キット
獣医専用
商品名： 腸炎ビブリオのリアルタイム PCR 検出キット
パッケージ： 50回のテスト
表示： このキットは、エビ筋肉組織中の腸炎ビブリオ DNA の核酸検出に適用できます。テスト結果は研究目的のみであり、臨床診断用ではありません。
主な成分と内容:
名前 | 仕様 | 量 |
VP 反応液 | 1000μl/チューブ | 1 |
VPポジティブコントロール | 250μl/チューブ | 1 |
ネガティブコントロール | 250μl/チューブ | 1 |
保管および賞味期限:
-20±5℃で保存、凍結融解を3回以下繰り返した場合、賞味期限は12ヶ月です。
試験方法:
1. 核酸抽出
核酸抽出は市販の DNA 抽出キットを使用できますので、キットの説明書に従ってください。
2. PCR増幅
2.1 試験サンプルの数を計算し、n+2 個の PCR 反応チューブを取り、各チューブに 20 μl の反応溶液を加えます。
2.2 上記の PRC 反応チューブに、ネガティブコントロール、ポジティブコントロール、サンプルの核酸をそれぞれ 5μl 加え、8000rpm で数秒間遠心し、蛍光定量 PCR にかける。
2.3 反応条件は、次のように設定するものとします。
増幅のパラメータ | |||
システム | 総量は25μlです | ||
信号収集 | VP 蛍光シグナル | FAM チャネルは蛍光シグナルを収集します | |
PCRの反応条件 | 段階 | 条件 | サイクル |
UNGプロセス | 37℃ 2分 | 1 | |
前変性 | 95℃ 30秒 | 1 | |
PCR | 95℃ 10秒 |
40 | |
60℃ 30秒 このフェーズの終わりに蛍光シグナルを収集するように設定します | |||
結果の解釈:
1. 妥当性の判断:
1.1 陽性対照: FAM チャネルの Ct 値 ≤ 32、および増幅曲線には有意な指数関数的増殖期があります。
1.2 ネガティブ コントロール: FAM チャネルに増幅曲線がないか、増幅曲線が直線またはわずかに斜めの線です。
2. 試験結果判定：
検体の FAM 検出チャンネルに 増幅曲線なし、それは次のように決定できます VP ネガティブ。
FAM 検出チャネルが指数関数的に増加する増幅曲線を持ち、Ct 値が ≤ 36、それは次のように決定できます VPポジティブ.
36 サンプルは次のように考える必要があります。 疑わしい結果、確認のために分析を繰り返す必要があります。
予防:
1. 実験室の管理は、PCR 遺伝子増幅実験室の管理仕様書に厳密に従うものとする。ラボの担当者は、専門的な訓練を受けている必要があります。実験プロセスは、異なるエリア（試薬調製エリア、検体調製エリア、増幅および生成物分析エリア）で厳密に実施する必要があります。すべての消耗品は、滅菌後に使い捨てるものとします。実験操作の各段階での特別な装置、機器、および備品は、相互に使用してはなりません。
2. 試薬および検体調製段階のための生物学的安全キャビネットを準備してください。実験中は白衣、使い捨て手袋、ピペッターを着用する。
3. 試薬の凍結融解の繰り返しは極力避けてください。使用前に、試薬を完全に解凍し、8000rpm で数秒間遠心分離する必要があります。
4. 検体調製エリアで使用したピペットは、消毒剤の入った容器に入れ、滅菌後廃棄物と一緒に捨ててください。
5. 実験後、作業台とピペッターを 10% 次亜塩素酸塩または 75% アルコールまたは紫外線ランプで処理しました。
製造:
名前： 山東Xindaの遺伝子技術Co.、株式会社
Shandong Sinder Technology Co., Ltdの子会社
住所: 山東省諸城市Shungeng Road、Bandaohuigu工業団地B2棟
郵便番号: 262233
電話: +86 - 0532 5882 0810
腸炎ビブリオ用リアルタイム PCR 検出キット
獣医専用
商品名： 腸炎ビブリオのリアルタイム PCR 検出キット
パッケージ： 50回のテスト
表示： このキットは、エビ筋肉組織中の腸炎ビブリオ DNA の核酸検出に適用できます。テスト結果は研究目的のみであり、臨床診断用ではありません。
主な成分と内容:
名前 | 仕様 | 量 |
VP 反応液 | 1000μl/チューブ | 1 |
VPポジティブコントロール | 250μl/チューブ | 1 |
ネガティブコントロール | 250μl/チューブ | 1 |
保管および賞味期限:
-20±5℃で保存、凍結融解を3回以下繰り返した場合、賞味期限は12ヶ月です。
試験方法:
1. 核酸抽出
核酸抽出は市販の DNA 抽出キットを使用できますので、キットの説明書に従ってください。
2. PCR増幅
2.1 試験サンプルの数を計算し、n+2 個の PCR 反応チューブを取り、各チューブに 20 μl の反応溶液を加えます。
2.2 上記の PRC 反応チューブに、ネガティブコントロール、ポジティブコントロール、サンプルの核酸をそれぞれ 5μl 加え、8000rpm で数秒間遠心し、蛍光定量 PCR にかける。
2.3 反応条件は、次のように設定するものとします。
増幅のパラメータ | |||
システム | 総量は25μlです | ||
信号収集 | VP 蛍光シグナル | FAM チャネルは蛍光シグナルを収集します | |
PCRの反応条件 | 段階 | 条件 | サイクル |
UNGプロセス | 37℃ 2分 | 1 | |
前変性 | 95℃ 30秒 | 1 | |
PCR | 95℃ 10秒 |
40 | |
60℃ 30秒 このフェーズの終わりに蛍光シグナルを収集するように設定します | |||
結果の解釈:
1. 妥当性の判断:
1.1 陽性対照: FAM チャネルの Ct 値 ≤ 32、および増幅曲線には有意な指数関数的増殖期があります。
1.2 ネガティブ コントロール: FAM チャネルに増幅曲線がないか、増幅曲線が直線またはわずかに斜めの線です。
2. 試験結果判定：
検体の FAM 検出チャンネルに 増幅曲線なし、それは次のように決定できます VP ネガティブ。
FAM 検出チャネルが指数関数的に増加する増幅曲線を持ち、Ct 値が ≤ 36、それは次のように決定できます VPポジティブ.
36 サンプルは次のように考える必要があります。 疑わしい結果、確認のために分析を繰り返す必要があります。
予防:
1. 実験室の管理は、PCR 遺伝子増幅実験室の管理仕様書に厳密に従うものとする。ラボの担当者は、専門的な訓練を受けている必要があります。実験プロセスは、異なるエリア（試薬調製エリア、検体調製エリア、増幅および生成物分析エリア）で厳密に実施する必要があります。すべての消耗品は、滅菌後に使い捨てるものとします。実験操作の各段階での特別な装置、機器、および備品は、相互に使用してはなりません。
2. 試薬および検体調製段階のための生物学的安全キャビネットを準備してください。実験中は白衣、使い捨て手袋、ピペッターを着用する。
3. 試薬の凍結融解の繰り返しは極力避けてください。使用前に、試薬を完全に解凍し、8000rpm で数秒間遠心分離する必要があります。
4. 検体調製エリアで使用したピペットは、消毒剤の入った容器に入れ、滅菌後廃棄物と一緒に捨ててください。
5. 実験後、作業台とピペッターを 10% 次亜塩素酸塩または 75% アルコールまたは紫外線ランプで処理しました。
製造:
名前： 山東Xindaの遺伝子技術Co.、株式会社
Shandong Sinder Technology Co., Ltdの子会社
住所: 山東省諸城市Shungeng Road、Bandaohuigu工業団地B2棟
郵便番号: 262233
電話: +86 - 0532 5882 0810
