アフリカ豚コレラウイルスリアルタイム PCR 検出キット (MGF/CD2V/VP72)
【商品名】
アフリカ豚コレラウイルスリアルタイム PCR 検出キット (MGF/CD2V/VP72)
【パッケージ】
50キット/箱
【主な成分と含有量】
名前 | 仕様 | 量 |
ASFV(MGF/CD2V/VP72)反応液 | 1000μl/チューブ | 1 |
ASFV (MGF/CD2V/VP72) 陽性コントロール | 250μl/チューブ | 1 |
ネガティブコントロール | 250μl/チューブ | 1 |
【保管と賞味期限】
-20±5℃で保存
,冷凍と解凍を3回以内繰り返した場合、賞味期限は12ヶ月です。
【試験方法】
1. 核酸抽出
核酸抽出は市販のDNA抽出キットをご利用いただけますので、キットの説明書に従ってください。
2. PCR増幅
2.1 試験サンプルの数を計算し、n+2 PCR 反応チューブを取り、各チューブに 20μl の反応溶液を加えます。
2.2 5μlを追加 l ネガティブコントロール、ポジティブコントロールの核酸、サンプルをそれぞれ上記の PCR 反応チューブに入れ、8000rpm で数秒間遠心分離し、蛍光定量 PCR アンプに入れます。
2.3 反応条件は次のように設定します。
アンプの関連パラメータ | |||
システム | 総量: 30μl | ||
信号収集
| ASFV (MGF/CD2V/VP72) 蛍光シグナル
| VP72-FAM チャネルが蛍光シグナルを収集 | |
CD2V-VIC/HEX チャネルが蛍光シグナルを収集 | |||
MGF-CY5チャンネルが蛍光シグナルを収集 | |||
PCR反応条件
| ステージ | Condition | サイクル番号 |
UNG処理 | 37℃:2分 | 1 | |
前退化 | 95℃:30秒 | 1 | |
PCR
| 95℃:10秒 |
40
| |
56℃:30秒 (この段階の最後に蛍光シグナルを収集するように設定します) |
【結果の解釈】
1. 検査キットの有効性の判定:
(1) ポジティブコントロール: FAM、HEX/VIC および CY5 チャネルの Ct 値 ≤ 32、明らかな指数関数的位相を伴う増幅曲線。
(2) ネガティブコントロール: FAM、HEX/VIC および CY5 チャネルには増幅曲線がないか、増幅曲線が直線またはわずかに斜めで、顕著な指数関数的位相がなく、Ct 値 ≥ 38 または Ct 値がありません。
2. 結果の判定:
結果判定 | FAMチャンネル | HEX /VIC チャンネル | CY5チャンネル |
VP72 ASFV 核酸陽性 | + | - | - |
CD2V ASFV 核酸陽性 | - | + | - |
MGF ASFV核酸陽性 | - | - | + |
VP72 および CD2V ASFV 核酸陽性 | + | + | - |
VP72 および MGF ASFV 核酸陽性 | + | - | + |
CD2V および MGF ASFV 核酸陽性 | - | + | + |
MGF、CD2V、VP72 ASFV 核酸陽性 | + | + | + |
MGF、CD2V、VP72 ASFV 核酸陰性 | - | - | - |
*ノート:
(1) 対数増殖期増幅曲線があり、Ct値≦35の場合+と判定します。増幅曲線がない場合、またはCt値>38の場合は-と判定します。35 < Ct 値 < 38 の場合、サンプルは疑わしいため、再検査する必要があります。再検査結果の Ct 値が依然として 35 ~ 38 の間にあり、明らかな対数増殖期がある場合は陽性と判断され、それ以外の場合は陰性と判断されます。
【予防】
1. 検査室の管理は、PCR 遺伝子増幅検査室の管理規定に厳密に従って行わなければなりません。研究所の職員は専門的な訓練を受けていなければなりません。実験プロセスは厳密に異なるエリア (試薬調製エリア、検体調製エリア、増幅および生成物分析エリア) で実施されます。すべての消耗品は滅菌後に使い捨てとします。実験操作の各段階での特別な装置、機器、および消耗品は、相互に使用してはならない。
2. 試薬および検体調製段階のために生物学的安全キャビネットを準備してください。実験中は、白衣、使い捨て手袋、ピペッターを使用します。
3. 試薬の凍結融解を繰り返すことはできる限り避けてください。使用前に試薬を完全に解凍し、8000rpm で数秒間遠心分離します。
4. 検体調製エリアで使用したピペットは消毒剤の入った容器に入れ、滅菌後廃液と一緒に捨ててください。
5. 実験後、作業台とピペッターを 10% 次亜塩素酸塩または 75% アルコールまたは紫外線ランプで処理しました。
【製造】
名前: 山東新達遺伝子技術有限公司
Shandong Sinder Technology Co., Ltd の子会社
住所: 山東省諸城市順興路八道会谷工業団地B2棟
郵便番号: 262233
電話: +86 - 0532 5882 0810
アフリカ豚コレラウイルスリアルタイム PCR 検出キット (MGF/CD2V/VP72)
【商品名】
アフリカ豚コレラウイルスリアルタイム PCR 検出キット (MGF/CD2V/VP72)
【パッケージ】
50キット/箱
【主な成分と含有量】
名前 | 仕様 | 量 |
ASFV(MGF/CD2V/VP72)反応液 | 1000μl/チューブ | 1 |
ASFV (MGF/CD2V/VP72) 陽性コントロール | 250μl/チューブ | 1 |
ネガティブコントロール | 250μl/チューブ | 1 |
【保管と賞味期限】
-20±5℃で保存
,冷凍と解凍を3回以内繰り返した場合、賞味期限は12ヶ月です。
【試験方法】
1. 核酸抽出
核酸抽出は市販のDNA抽出キットをご利用いただけますので、キットの説明書に従ってください。
2. PCR増幅
2.1 試験サンプルの数を計算し、n+2 PCR 反応チューブを取り、各チューブに 20μl の反応溶液を加えます。
2.2 5μlを追加 l ネガティブコントロール、ポジティブコントロールの核酸、サンプルをそれぞれ上記の PCR 反応チューブに入れ、8000rpm で数秒間遠心分離し、蛍光定量 PCR アンプに入れます。
2.3 反応条件は次のように設定します。
アンプの関連パラメータ | |||
システム | 総量: 30μl | ||
信号収集
| ASFV (MGF/CD2V/VP72) 蛍光シグナル
| VP72-FAM チャネルが蛍光シグナルを収集 | |
CD2V-VIC/HEX チャネルが蛍光シグナルを収集 | |||
MGF-CY5チャンネルが蛍光シグナルを収集 | |||
PCR反応条件
| ステージ | Condition | サイクル番号 |
UNG処理 | 37℃:2分 | 1 | |
前退化 | 95℃:30秒 | 1 | |
PCR
| 95℃:10秒 |
40
| |
56℃:30秒 (この段階の最後に蛍光シグナルを収集するように設定します) |
【結果の解釈】
1. 検査キットの有効性の判定:
(1) ポジティブコントロール: FAM、HEX/VIC および CY5 チャネルの Ct 値 ≤ 32、明らかな指数関数的位相を伴う増幅曲線。
(2) ネガティブコントロール: FAM、HEX/VIC および CY5 チャネルには増幅曲線がないか、増幅曲線が直線またはわずかに斜めで、顕著な指数関数的位相がなく、Ct 値 ≥ 38 または Ct 値がありません。
2. 結果の判定:
結果判定 | FAMチャンネル | HEX /VIC チャンネル | CY5チャンネル |
VP72 ASFV 核酸陽性 | + | - | - |
CD2V ASFV 核酸陽性 | - | + | - |
MGF ASFV核酸陽性 | - | - | + |
VP72 および CD2V ASFV 核酸陽性 | + | + | - |
VP72 および MGF ASFV 核酸陽性 | + | - | + |
CD2V および MGF ASFV 核酸陽性 | - | + | + |
MGF、CD2V、VP72 ASFV 核酸陽性 | + | + | + |
MGF、CD2V、VP72 ASFV 核酸陰性 | - | - | - |
*ノート:
(1) 対数増殖期増幅曲線があり、Ct値≦35の場合+と判定します。増幅曲線がない場合、またはCt値>38の場合は-と判定します。35 < Ct 値 < 38 の場合、サンプルは疑わしいため、再検査する必要があります。再検査結果の Ct 値が依然として 35 ~ 38 の間にあり、明らかな対数増殖期がある場合は陽性と判断され、それ以外の場合は陰性と判断されます。
【予防】
1. 検査室の管理は、PCR 遺伝子増幅検査室の管理規定に厳密に従って行わなければなりません。研究所の職員は専門的な訓練を受けていなければなりません。実験プロセスは厳密に異なるエリア (試薬調製エリア、検体調製エリア、増幅および生成物分析エリア) で実施されます。すべての消耗品は滅菌後に使い捨てとします。実験操作の各段階での特別な装置、機器、および消耗品は、相互に使用してはならない。
2. 試薬および検体調製段階のために生物学的安全キャビネットを準備してください。実験中は、白衣、使い捨て手袋、ピペッターを使用します。
3. 試薬の凍結融解を繰り返すことはできる限り避けてください。使用前に試薬を完全に解凍し、8000rpm で数秒間遠心分離します。
4. 検体調製エリアで使用したピペットは消毒剤の入った容器に入れ、滅菌後廃液と一緒に捨ててください。
5. 実験後、作業台とピペッターを 10% 次亜塩素酸塩または 75% アルコールまたは紫外線ランプで処理しました。
【製造】
名前: 山東新達遺伝子技術有限公司
Shandong Sinder Technology Co., Ltd の子会社
住所: 山東省諸城市順興路八道会谷工業団地B2棟
郵便番号: 262233
電話: +86 - 0532 5882 0810